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香菇新菌株庆科20选育报告
2020-02-08 00:25 来源:未知

【核心提示】:陈俏彪 吴应淼 叶长文 摘 要:以香菇主栽菌株庆元9015为母本,选出优良变异株庆科20,该菌株具有独特的PCR扩增条带和

陈俏彪  吴应淼  叶长文 

摘 要:以香菇主栽菌株"庆元9015"为母本,选出优良变异株"庆科20",该菌株具有独特的PCR扩增条带和蛋白电泳图谱,与"庆元9015"等菌株具有明显的遗传差异.该菌株春栽鲜菇单产比"庆元9015"和"241-4"分别增加7.7%和16.5%;秋栽鲜菇单产比"庆元9015"和"Cr02"分别增加3.3%和18.9%;花菇栽培平均单产比"135"增加20.7%.

关键词:香菇;选育;变异;高产;优质

分类号:S646.120.31  文献标识码:A

文章编号:1005-9873(2005)04-0045-05

我国是香菇生产大国和香菇出口大国,筛选和推广香菇良种是香菇产业可持续发展的关键。香菇主栽菌株“241-4”、“庆元9015”、“135”等随着栽培年限的增长相继出现种性退化、产量品质降低等趋势,香菇生产急需优良的替代菌株。浙江省庆元县食用菌科研中心继选育出香菇当家菌株“241-4”和“庆元9015”后2000年3月又成功选育出高产、高抗、优质、高效的香菇新菌株“庆科20”,它克服了“庆元9015”菌柄过长、连体丛生等不足,并适宜作高棚层架栽培花菇和低棚脱袋栽培普通菇。该菌株于2005年2月通过了省级品种认定(认定编号:浙认菌2005001)。

1 材料与方法

1.1“庆科20”母本选择

母本为庆元县香菇(Lentinula edodes)主栽菌株“庆元9015”。

1.2供试菌株

供试香菇菌株“庆元9015”、“241-4”、“135”、“Cr02”、“66”、“868”和“南花103”等由庆元县食用菌科研中心保藏提供。

1.3选育方法

1997年,庆元县食用菌科研中心从“庆元9015”栽培场采集到23只菇柄短、单生、长势好的子实体,经组织分离→拮抗试验→出菇试验→品比试验→稳定性观察→生物学特性、栽培特性研究,选择采种顺序为“20”的菌株进行中试推广。2000年将该菌株定名为“庆科20”。

1.4实验室筛选

挑选菌柄短的菇体进行纯种分离,并进行菌丝拮抗试验、菌丝耐温培养、菌丝长势和形态观察等试验,剔除菌丝长势弱的株系。

1.5栽培筛选

1.5.1 初筛

所获菌株按常规培养料配方(杂木屑78%、麦麸20%、红糖1%、石膏粉1%,含水量55-60%)进行出菇试验,淘汰菌柄过长、子实体有丛生、产量过低的株系。

1.5.2 复筛

所获菌株按常规培养料配方(同1.5.1)进行品比试验。从品质、产量、菌柄等性状进行比较筛选,淘汰性状不稳定遗传的株系。

1.5.3中型生产试验

1999~2000年在庆元县及其毗邻的龙泉、景宁及福建省的松溪、政和、寿宁等县市高(800~1200m)、中(500~800m)、低(300~500m)三种不同海拨高度分别设点进行产量鉴定和品比试验,接种期安排在春季,出菇后抽样进行评价分析。

1.6 PCR扩增条带分析

PCR扩增条带分析采用CTAB/NaCl法[1.2]提取香菇菌株全基因组DNA。PCR扩增采用PX2(美国Thermo Hybaid公司)MJ梯度PCR仪,反应所需的dNTP、Tap酶、PCR缓冲液和随机引物S375均由上海生物工程公司提供。。

1.7蛋白电泳分析

蛋白电泳分析采用垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳法(PAGE),谱带迁移率(Rf值)计算参照文献[3]介绍的方法。

2 结果与分析

2.1 生物学特性

2.1 .1形态特征

“庆科20”菌株孢子印白色,菌丝密集浓白,子实体单生,朵型圆整,菌盖表面颜色较淡,为淡褐色,含水量高时颜色较深,菌盖直径2.0~7.0cm,菌肉组织致密,厚0.5~1.5cm,菇柄直且短,长2.8~4.0cm,直径0.8~1.3cm;菌褶整齐、较致密,呈辐射状排列,易开膜,条件适宜时易形成花菇。

2.1.2 拮抗试验结果

菌丝拮抗试验显示,“庆科20”与“241-4”、“135”、“Cr02”有明显的拮抗作用,与“庆元9015”无明显拮抗作用。表明“庆科20”是一个与“241-4”、“135”属不同品系的菌株,但与“庆元9015”具有较近的亲缘关系。

2.1.3 PCR扩增条带分析结果

1=“66”

2=“868”

3=“庆元9015”Qingyuan9015

4=“庆科20”Qingke 20

5=“241-4”

图1 5个香菇菌株的PCR扩增条带图谱

Fig.1 PCR amplification band pattern of five Lentinula edodes strains

“庆科20”、“庆元9015”、“241-4”、“66”、“868”5个菌株的PCR扩增条带表明(图1),“庆科20”具有与其它参试菌株不同的带型,与“庆元9015”等具有明显的遗传差异。

2.1.4蛋白电泳分析结果

1=“241-4”

2=“庆科20”Qingke 20

3=“庆元9015”Qingyuan9015

图2 3个香菇菌株蛋白电泳图谱

Fig.2 The protein electrophoretic profile of three Lentinula edodes strains

从图2中可以看出3个菌株具有各自独特的电泳图谱,“庆科20”和“庆元9015”均有17条蛋白带,但有明显不同之处,而“241-4”拥有20条蛋白带,“庆科20”与“庆元9015”等菌株具有明显的遗传差异。

2.2栽培特性

2.2.1栽培特性

“庆科20”菌株属中低温型中熟菌株。菌丝体生长适温为22~27℃,出菇适宜温度8~22℃,最适14~18℃, 9月下旬~翌年5月出菇,子实体单生,其分化和发生需一定的昼夜温差刺激;适宜接种期2~7月份,最适为3~5月,不同接种期菌棒的出菇期、香菇产量无明显差异,但冬菇率、折干率等会随接种期提前而提高。

2.2.2菌株抗逆性

“庆科20”、“庆元9015”、“南花103”、“135”4个的进行接种成活率和菌棒成品率对比试验表明,“庆科20”与“庆元9015”、“南花103”的接种成活率和菌棒成品率比较高,而“135”菌株的接种成活率和菌棒成品率明显低于其它3个菌株。

2.2.3栽培与产量表现

经过1997~2000年3个产季的初筛、复筛和中型生产试验表明,“庆科20”栽培性状稳定、产量高、品质优、商品性好、抗性较强、适应性广,适宜高棚层架栽培花菇和低棚脱袋栽培普通菇。表1数据表明,“庆科20”比“庆元9015”和“241-4”袋单产分别提高3.9%和21.5%,产值分别提高14.3%和18.6%。“庆科20”具有适应性广,稳定性强和高产优质的特点。

表1 不同海拔高度中试结果

Table 1 Comparison table of different elevation pilot experiment

海拔高度Elevation(m) 菌株Strains 单产Per bag yield(g) 产值value(Yuan /Per bag) 生物效率Bioefficiency(%)

300~500 庆科20Qingke 20 90 2.99 113

9015 84 2.62 105

241-4 77 2.57 96

500~800 庆科20Qingke 20 97 3.16 121

9015 95 2.72 119

241-4 79 2.58 99

800~1200 庆科20Qingke 20 101 3.21 126

9015 98 2.85 123

241-4 81 2.74 101

2.2.3.1春季栽培试验结果 春季栽培试验(接种日期为4月13日)结果为“庆科20”、“庆元9015”、“241-4”的生物效率分别为141%、131%、121%,“庆科20”生物效率比“庆元9015”和“241-4”分别高7.7%和16.5%。显著性分析[4]表明,“庆科20”的生物效率显著高于“庆元9015”和“241-4”。

2.2.3.2秋季栽培试验结果 秋季栽培试验(接种日期为8月24日)结果为“庆科20”秋栽生物效率为118%,比“庆元 9015”和“Cr02”分别高3.3%和18.9%。显著性分析[4]表明,“庆科20”的生物效率与“庆元9015”无显著差异,但“庆科20”与“庆元9015”的生物效率都显著高于“Cr02”。

2.2.3.3花菇栽培试验结果 花菇栽培试验结果显示,“庆科20”花菇单产239g/袋,比“庆元9015”、“135”、“南花103”分别高9.1%、20.7%、46.6%。花菇率以“135”的45.4%最高,“庆科20”次之,为44.7%,“庆元9015”和“南花103”的花菇率则分别为42.4%和37.9%。尽管“135”的花菇率比“庆科20”高,但其产出少。试验结果表明,“庆科20”适合花菇栽培,且综合表现优于“庆元9015”、“135”、“南花103”。

2.2.3.4花菇形成速度

“庆科20”和“135”花菇形成速度观察测试结果表明,在连续5d晴朗、适度通风的条件下,“庆科20”和“135”的菇蕾在割口[5]培养60~70h后,菇盖表面均形成深浅不一的白色裂纹,两个菌株在花菇的形成速度上不存在明显差异。

试验还发现“庆科20”菌株已形成白色花纹的花菇,受环境湿度变化的影响没有“135”菌株明显。空气湿度高65%以上时,“庆科20”花菇的花纹能保持较长时间,而 “135”菌株的花菇盖面会很快转为棕红色,裂纹逐步消失。

2.3子实体质量

2.3.1子实体形态

“庆科20” 朵型圆整,菌盖中等,菇柄短而中空,畸形菇少,菌盖占总菇重的85.2%,比“庆元9015”、“241-4”、“Cr02”的菌盖占总菇重分别高6.4%、0.8%、3.9%,可见“庆科20”菌株更适于生产剪柄菇。“庆科20”菌株每潮菇的菇体大小较“庆元9015”、“241-4”和“Cr02”均匀,而3个菌株的菇体大小相对就参差不齐。

2.3.2子实体品质

通过对“庆科20”、“庆元9015”、“241-4”、“Cr02”4个菌株的香菇子实体的含水量、干鲜比、收缩率、肉质疏密、食用口感、保鲜期进行比较,“庆科20”菌株的子实体含水量88.3%、干鲜比1:8.7、收缩率31.0%、肉质致密、食用口感鲜嫩、保鲜期较长,“庆元9015”、“241-4”与“庆科20”的上述特征较为接近,而“Cr02”较差(含水量90.5%、干鲜比大、收缩率38.6%、肉质疏松、食用口感略差、保鲜期相对偏短)。

2.3.3花菇质量比较

表2数据表明,“庆科20”菌株的白花菇比重大,质量品位好,达到“135”水平,明显优于“庆元9015”和“南花103”,适宜进行花菇栽培。

表2 各等级花菇[5]比例 (%)

Table 2 The statistics of var99RE5久久热在这里精品iety figured mushroom rate(%)

菌株Strains 天白花菇White figuredmushroom 茶花菇Fulvous figuredmushroom 伞花菇Opening figured mushroom

135 27.2 54.2 18.6

庆科20Qingke 20 28.5 50.8 20.7

9015 20.4 51.0 28.6

南花103Nanhua 103 21.3 48.6 30.1

3 讨论

3.1“庆科20”是一个具有区别于亲本和其他供试菌株的PCR扩增条带、蛋白电泳图谱的香菇新菌株。

3.2“庆科20”菌株子实体朵型圆整、菇盖平整,组织致密,食用口感鲜嫩,含水量低,折干率高,菇柄短而中空,畸形菇少。

3.3 “庆科20”栽培性状稳定、产量高、品质优、商品性好、抗性较强、适应性广,易形成花菇,花菇率高,适宜作高棚层架栽培花菇和低棚脱袋栽培普通菇。

Studies on Selection and Breeding of "Qingke 20"-- A New Strain of Lentinula edodes

Chen Qiaobiao Wu Yingmiao Ye Changwen

(Science & Research Center of Edible Fungi QingYuan, Zhejiang , 323800, P.R.China)

ABSTRACT: Using the main cultivation strain of Lentinula edodes Qingyuan 9015 as the start strain, a good quality variation strain QingKe 20 was久草在线高清全免费 breeded. This strain showed specific PCR amplification band and protein electrophoretic profile, which showed significantly genetic difference with other strains such as Qingyuan 9015 et al. Per bag yield of spring cultivated fresh mushroom was increased 7.7% and 16.5% than Qingyuan 9015 and 241-4. Per bag yield of autumn cultivated fresh mushroom was increased 3.3% and 18.9% than 9015 and Cr02. Average per bag yield of figured mushroom cultivated fresh mushroom was increased 20.7% than 135.

KEY WORDS: Lentinula edodes, Breeding, Variation, High yield, High quality

 

作者简介:陈俏彪(1963-),男,1987年毕业于浙江农业大学植物保护专业,高级农艺师,主要从事食用菌栽培与育种研究,发表主笔论文3篇,出版论著3部.

作者单位:陈俏彪(浙江省庆元县食用菌科研中心,浙江,庆元,323800) 

     吴应淼(浙江省庆元县食用菌科研中心,浙江,庆元,323800) 

     叶长文(浙江省庆元县食用菌科研中心,浙江,庆元,323800) 

参考文献:

[1]Borroso G,Perennes D,Labarere J.A miniprep method for RFLP analysis and dsRNAs detection perfected in the cutivated fungus Agrocybe aegerita [C].Science and Cultivation of Edible Fungi,1995,87~94.

[2]Ausubel FM,Brent R,Kingston RE,et al.Current protocols in molecular biology[J].New York:Greene Publishing and Wiley-Interscience,1993,66~ 67.

[3]胡能书,万贤国.同工酶技术及其应用[M].长沙:湖南科学技术出版社,1985.

[4]南京农业大学主编.田间试验与统计分析[M].北京:农业出版社,1993.

[5]吴学谦.香菇生产全书[M].中国农业出版社,2005.332,400.

食用菌学报 2005年第4期 No.10

 
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